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外泌体的产生与作用机制一开始,细胞膜内陷形成早期核内体。接着,细胞将一些颗粒物质装到早期核内体中,形成晚期核内体。后,晚期核内体与细胞膜特定部位融合后形成芽泡,将泡体中的外泌体释放到细胞外。至此,外泌体完成分泌。

外泌体可通过配体 - 受体相互作用,粘附到受体细胞表面,或者被受体细胞内吞或经过囊泡和细胞膜的直接融合,使外泌体内容物释放转移到内。至此,外泌体完成从一个细胞到另一个细胞的转移。

外泌体发挥生物学效应的方式主要有两种:一是直接作用。外泌体表面的蛋白分子或脂质配体直接表面的受体,产生信号复合体并胞内信号通路。二是递送作用。外泌体可以与的质膜融合或内吞直接进入细胞,将自身携带的蛋白质、核酸、脂质等活性分子带到细胞内,外泌体生产厂家,进而调控细胞的功能及生物学行为。





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如何分离外泌体?

我们可以通过不同的分离方法从生物体液中进行外泌体分离,下面选取几种方法分别做介绍:

差速离心:差速离心是大家熟悉的一种分离方法,文献中用得多的且也是目前比较能受到认可的方法。差速离心是先通过低速离心去除细胞和细胞凋亡碎片,外泌体代工厂,再通过超高速去除大囊泡和沉淀外泌体。此方法分离得到的外泌体可用于后续的鉴定实验、分子检测实验、细胞实验和动物实验。

密度梯度离心:此方法多指蔗糖密度梯度离心。此方法从不同密度的颗粒中分离出囊泡,对离心的时间比较敏感。如果外泌体和颗粒密度相似,外泌体可能会被其他颗粒污染。

超滤:超滤过程中需要用超滤膜进行外泌体隔离。在分离过程中,外泌体可能会阻塞过滤孔,导致膜的寿命减短,分离效率较低。同时,外泌体会粘附在膜上,导致产量降低。

磁珠法:用包被抗标记物的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合,即可将外泌体吸附并分离出来。该方法分离得到的外泌体的生物活性易受pH和盐浓度影响,不利于下游实验。

试剂盒分离法:目前商业化的外泌体提取试剂盒多种多样,提取效果良莠不齐。同时试剂盒本身的价格比较高,淡纹外泌体,且外泌体的得率和纯度一般,不是高的一种分离方法。此方法得到的外泌体对于后续的鉴定实验、细胞实验和动物实验等可能有影响。





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关于真皮层方面

1. 促进成纤维细胞的增殖能力成纤维细胞是真皮层主要的细胞,可产生细胞外基质 (ECM) 。成纤维细胞在体内几乎不增殖,其功能受损及细胞外基质的改变与外源性皮肤老化密切相关。 随着年龄增长,甘肃外泌体,人体真皮层成纤维母细胞的数量和活性是呈现下降趋势。 外泌体可增强成纤维细胞的增殖能力,具有浓度依赖性,可逆转紫外线诱导的成纤维细胞老化,但对内源性老化因素所致细胞衰老作用不明显。

2. 抑制基质金属蛋白酶(MMPs)基质金属蛋白酶 (MMPs) 由成纤维细胞、内皮细胞等合成,主要负责细胞外基质的降解,尤其是构成真皮结构的胶原纤维与弹力纤维,故MMPs是调节皮肤光老化的主要靶标之一。 MSC-exo对MMPs的调节能减少真皮层弹性和胶原纤维的损伤,改善真皮层老化。



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